Фенотипическая дерматология в свете возможностей родоструктурной экспликации мембранных событий на поверхности клеток кожи человека

Аннотация. Изобретение способа получения цитоиммунограммы кожи открывает путь к новому пониманию процессов, происходящих в коже человека на уровне субпопуляций клеток. Возможность оценить количественные и функциональные показатели состояний клеток кожи ex tempore и после криоконсервации обосновывает практическое применение способа. Результаты экспериментальных исследований кожи на клеточном уровне демонстрируют новые диагностические возможности в дерматологии как научной дисциплине и практике. Методом концептуального анализа обосновывается разнообразие состояний субпопуляций клеток кожи, что открывает целый класс исследовательских задач для изучения фенотипов клеток и дальнейшего углубления знаний об этиологии и патогенезе заболеваний кожи.

Ключевые слова: цитоиммунограмма кожи, фенотип клетки, фенотипическая дерматология

Актуальность применения проточной цитометрии для оценки фенотипического разнообразия клеток кожи

Дефицит патогенетических сведений о морфологических проявлениях заболеваний кожи заставляет дерматологов упрощать наблюдаемые явления до известных диагнозов, обосновывая диагностику и лечение заболеваний кожи только визуализацией последних. Зачастую при постановке диагноза дерматолог использует известные ему абстрактные понятия, отношения между которыми только приблизительно отражают связи между реально существующими клетками кожи и мембранными событиями на их поверхности.

Бесспорно, диагнозы имеют значение уже потому, что они относительно верно, но все же отображают свойства и отношения элементов исследуемых совокупностей. Это дает возможность описывать наблюдаемую картину и с помощью языка осуществлять накопление и передачу знаний. Однако реальные сведения о взаимодействующих между собой клетках эпидермиса и дермы свидетельствуют об их способности поддерживать патологические процессы как всего организма [1], так и in situ [2]. При обсуждении видимой части воспалительных процессов и патогенетических механизмов, лежащих в основе их появления, следует рассматривать их частями единого целого. Точнее, как систему разнородных объектов, объединенных в одно целое – кожу человека. Функционально взаимодействуя друг с другом, эти части определяют все разнообразие наблюдаемых дерматологами элементов сыпи и их трансформаций.

При этом каждая клетка кожи может рассматриваться как отдельная целостность, состоящая из собственных частей и мембранных событий на поверхности, определяющих фенотип клетки. Она также может быть исследована как система.

Длительное время единственным способом получения объективной информации о морфофункциональном состоянии клеток кожи оставалась инцизионная биопсия, инвазивность которой ограничивала ее применение и практически исключала динамические наблюдения.

В свою очередь, неинвазивные методы исследования кожи, описывая ряд свойств кожи, не дают возможности оценить сложный комплекс межклеточных взаимодействий. При всей своей убедительности в решении отдельных задач дерматологии они не позволяют получить достоверных сведений о функциональных различиях клеток кожи в количественном выражении. Однако современная дерматология, прежде всего, как наука, испытывает настоятельную потребность в прижизненных методах морфофункционального исследования кожи.

Это обстоятельство делает актуальным изучение фенотипа клеток кожи [3], знание о котором позволит усилить диагностический инструментарий дерматолога примерно так, как это случилось во времена открытия микроскопа. Тем более что динамика в сторону увеличения разнообразия заболеваний кожи намного выше скорости активного использования новых методов диагностики.

На данном этапе научного развития непосредственное наблюдение мембранных событий на поверхности клеток кожи неосуществимо, но о них можно судить по показаниям проточного цитометра, которые допустимо считать наблюдаемыми величинами. Использование высокоточного прибора позволяет исключить ошибки и субъективизм наблюдений. Это даст возможность ввести в дерматологию точное обоснование диагнозов на основе наблюдаемых феноменов и тем самым осуществить диалектический скачок от эмпирической формы диагностики заболеваний кожи к рационально-теоретической.

С учетом того, что кожа функционирует через специализацию субпопуляций клеток [4], а визуально различимые картины заболеваний кожи являются лишь следствием сложнейшего комплекса межклеточных взаимодействий, изучение фенотипа образующих ее клеток является актуальной задачей дерматологии. Очевидно также, что подлинное развитие дерматологии не представляется возможным в отрыве от клеточных технологий. При этом клеточные технологии исключительно стимулируют обновление дерматологии, которое позволяет досконально изучить процессы формирования разнообразия фенотипов клеток кожи, отражающих их специализацию и избирательность функций.

Так, фенотипирование методом проточной цитометрии позволяет характеризовать клетки, как количественно, так и функционально, обнаруживая явления, встречающиеся с частотой 10^–5 – 10^–7.

Показания проточной цитометрии позволяют оценивать морфологические характеристики клеток, определяя субпопуляционный состав и с высокой точностью характеризовать их функциональное состояние [4]. Открытие способа получения цитоиммунограммы кожи, отражающей состояние и функциональность ее клеток, породило возможность детального изучения клеточных субпопуляций не только периферической крови, но и кожи [5].

Экспериментальное построение цитоиммунограмм кожи проводится с использованием инвазивного способа, включающего в себя забор биоптата кожи на глубину 2 мм с помощью инструмента для панч-биопсии 2 мм. Полученный образец кожи возможно исследовать ex tempore либо после криоконсервации. Методом проточной цитометрии проводится фенотипирование клеточной суспензии на проточном цитометре Beckman Сoulter Cytomics FC500.

Поскольку известно, что резидентные клетки играют главную роль в гомеостазе кожи [6], выбор типа маркеров определяется задачей исследования, для решения которой необходимо выделение наиболее влияющих на патогенез изучаемого заболевания субпопуляций клеток кожи. В качестве базового набора маркеров, характеризующих динамику мембранных событий субпопуляций клеток кожи рекомендуются: CD3, CD4, CD8, CD14, CD16, CD19, CD34, CD44, CD45, CD49, CD54, CD63, CD80, CD146, CD203c; CD207, CD249 [7].

Проточная цитометрия, позволяюая анализировать субпопуляции клеток и идентифицировать любое их количество, а также измерять их поверхностные и внутриклеточные маркеры, оценивая их функциональное состояние, вместе с запросом врачей-дерматологов к более строгому пониманию патологических процессов на клеточном уровне обязывают к методологической стандартизации диагностических возможностей и подходов к измерению открывшегося разнообразия функциональных состояний клеточных фенотипов кожи для диагностической и лечебной практики.

Решение обозначенной проблемы видится путем применения метода концептуального анализа, конструктивно и всецело ориентированного на получение практически и теоретически значимых результатов [8]. Все они направлены на конструирование и синтез понятий в тех областях практики, которые нуждаются в концептуально строгих различениях реальности [9].

Введение столь непривычного взгляда на решение проблемы сделано намеренно, в пользу максимальной объективности суждений. Результаты такого подхода, позволяющего глубже, полнее и точнее познавать свойства и закономерности изучаемого объекта, достигаются созданием концептуальных схем, представляющих собой отображение существующего материального мира. Существо подхода состоит в следующем.

1. В качестве основного инструментария анализа экспериментальных данных о состояниях и динамике клеточных субпопуляций выбрана технология, оперирующая концептами на основе строгих математических методов и позволяющая выводить логически непротиворечивые следствия из утверждений и предположений, полученных опытным путем. Основания для выбора концептуальных методов анализа по отношению к обнаруженной проблеме следующие:

• Концепты используются в неразрывной взаимосвязи двух своих существенных граней: объема понятий и содержания. И поскольку клеточный уровень исследования состояний кожи напрямую выводит к исследованию структур субпопуляций клеток, образованных из различных множеств, то это дает шанс через исследование этих множеств как объемов стоящих за ними понятий выйти к содержанию данных понятий и концептуально различить все разнообразие состояний кожи;
• Базовой логикой концептуальных методов является логика восхождения от наблюдаемого конкретного к мысленно абстрактному и через него – к порождению разнообразия мысленно конкретного. Это означает, что по ограниченному составу экспериментально полученных структур субпопуляций клеток может быть получено разнообразие всех теоретически возможных клеточных феноменов, что позволит выйти к теоретически полной картине состояний кожи. Такая возможность концептуализации экспериментальных результатов открывает простор научным исследованиям, существенно опережающим скорость появления новых дерматологических заболеваний;
• Все операции над понятиями совершаются в концептуальной технологии инструментально. Для этого используются логико-математические средства: исчисление высказываний, математическая теория родов структур [10] и аппарат ступеней множеств [11]. Это позволяет методично и строго выводить все логические следствия из результатов синтеза понятий. Такими следствиями являются новые понятия, которые не были очевидны в начале концептуализации и не могли появиться в ходе поставленных экспериментов. Возможность инструментально порождать новые понятия позволит существенно усилить результативность экспериментальной дерматологии, выводя из экспериментов следствия, далеко выходящие за границы наблюдений.

2. Предлагается концептуализацию экспериментальных феноменов проводить в трех предметных областях, построенных в логике углубления различения состояний кожи:

1. Феноменология статичного состояния кожи. В границах этой предметной области могут быть получены концепты, определяющие полное разнообразие клеточных субпопуляций, разнообразие субпопуляций с различением в них разнообразия признаков клеток, состояний активности клеток, функций клеток в структуре конкретной пункционной биопсии кожи, структур функций субпопуляций и другие феномены, рассмотренные в статике;
2. Феноменология переходов состояний кожи (динамика состояний). В границах этой предметной области могут быть различены все виды изменений состояния кожи, построена типология динамик состояний кожи, установлено разнообразие цепочек возможных переходов, структур цепочек и другие возможные феномены изменения состояний кожи;
3. Феноменология обусловленных переходов состояний кожи. В границах этой предметной области могут быть представлены явления, возникающие при различных видах искусственного и естественного вмешательства в состояния кожи, в их динамику; типология вмешательств; типология теоретически возможных цепочек переходов между состояниями кожи, обусловленных вмешательствами, и другие феномены практического влияния на кожу.

3. Выбрана исследовательская стратегия последовательного овладения предметными областями и областями, которые могут быть синтезированы из них. Это решение связано с двумя обстоятельствами. Во-первых, результаты концептуализации одной, более простой предметной области неизбежно окажут влияние не исходные представления, необходимые для постижения другой, более сложной. Во-вторых, параллельно работе с предметными областями будет развиваться и экспериментальная ветвь дерматологии, ориентированная на исследование свойств кожи на уровне клеток.

Результаты измерений, выраженные с помощью чисел, можно подвергнуть математической обработке и таким образом исследовать феноменологию состояний субпопуляций клеток кожи концептуальными методами [12].

Концептуализация цитоиммунограмм кожи

Для построения ряда концептов в математическом аппарате родов структур, который задействуется в концептуальных методах, приняты исходные положения, выведенные из результатов ранее полученных цитоиммунограмм кожи, они могут быть обобщены в следующих утверждениях:

• В создании феноменов состояний кожи участвует ограниченное разнообразие видов клеток, их двенадцать (К=12). Причем пять из них – одного типа (лимфоциты);
• Клетка каждого вида обладает определенным составом признаков, которые обнаруживаются с помощью маркеров – кластеров дифференцировки молекул на поверхности клеток (CD). Каждый маркер выступает в роли однозначного индикатора того или иного проявленного признака клетки;
• Количество CD по мере развития науки увеличивается и их индикативная составляющая уточняется. Однако в каждом исследовательском акте применяется ограниченный состав маркеров. Разумеется, это влияет на точность распознавания разнообразия признаков клеток и разнообразия видов клеток;
• Количество потенциально возможных функций каждой клетки определяется комбинациями всех ее признаков;
• Количество взятых к изучению признаков ограничено – двадцать четыре для клетки каждого вида. Причем один из таких признаков характеризует конкретный вид клетки;
• Живые клетки активны всегда. Но их активность по-разному проявляется и влияет на состояние кожи. Активность клетки – это проявление ее определенной функции в структуре конкретной пункционной биопсии кожи. Если клетка не проявляет никакой функции, то можно говорить, что ее активность равна нулю, хотя она и жива. Принято считать, что при этом клетка пассивна;
• Клетки каждого вида могут проявлять (либо не проявлять) одну или сразу несколько различных функций. Это определяется составом (комбинацией) признаков клеток;
• Количество потенциально возможных функций каждой клетки определяется всеми комбинациями всех ее признаков;
• Клетки объединяются в субпопуляции. В каждой субпопуляции участвует конкретная доля клеток каждого вида со своими разными функциями. При этом допустимы все теоретически мыслимые субпопуляции, поскольку ограничений на их разнообразие не существует либо они не известны;
• Субпопуляция с конкретным составом клеток, каждая из которых с конкретным составом функций, образует фенотип субпопуляции;
• Каждой комбинации фенотипов субпопуляции однозначно соответствует конкретное иммунологическое состояние кожи, выражаемое в клиническом или физикальном симптоме.

Эти утверждения служат основанием для порождения концептов, каждый из которых определяет класс возможных феноменов и позволяет различать разнообразие ситуаций, возникающих в коже при рассмотрении результатов ее исследований на клеточном уровне. Далее с короткими пояснениями приводятся лишь те концепты, которые определяют статичные феномены кожи. Их можно рассматривать как мгновенные «срезы» динамики ее состояний. Концепты приводятся в математическом аппарате родов структур, который задействуется в концептуальных методах.

Поскольку у любой клетки каждого вида может проявиться любое сочетание признаков, то эта структура устанавливает полное разнообразие всех комбинаций признаков, которые только могут быть у клетки кожи любого вида. Учитывая, что каждая комбинация признаков клетки указывает на активность ее определенной функции, то эта структура выражает одновременно полное разнообразие функций, которые могут активировать клетки, независимо от их вида.

Если количество признаков каждой клетки равно Р, а по одному из них определяют вид самой клетки, то разнообразие комбинаций признаков и, следовательно, функций клеток может достигать числа 2 (Р-1)-1. Здесь учтено, что если никаких признаков клетка не проявляет (пустое подмножество признаков – ∅) , то она функционально пассивна. С учетом известного количества признаков клетки каждого вида (Р = 24) получается, что максимальная мощность гипотетического разнообразия функций одной клетки любого вида (F) составляет более 8 миллионов (конкретно: F = 8 388 607). Причем каждая из этих функций может быть различима.

С целью демонстрации возможностей метода возьмем базисное множество:

Х1 – множество признаков клетки любого вида, которые экспериментально обнаруживаются кластерами дифференцировки.

Родовое отношение будет выражено следующей структурой:

D1 ∈ B(Х1).

Тип этой структуры: «Множество всех подмножеств признаков клетки».

Пример.

Предположим, что у клетки не 24 признака, а всего 3. То есть пусть множество Х1 = {a, b, c}.

Тогда комбинации из этих признаков образуются так:

В(Х1) = {{a}, {b}, {c}, {a,b}, {a,c}, {b,c}, {a,b,c}, {}}.

Выходит, что количество комбинаций равно 2³. Без пустого множества, которое свидетельствует о пассивности клетки, то количество «активных» комбинаций получается так: 2³-1.

Каждая комбинация – это функция клетки. Стало быть, из трех признаков образуется семь комбинаций – семь функций:

{a}, {b}, {c}, {a,b}, {a,c}, {b,c}, {a,b,c}

Этот результат концептуализации позволяет определять каждую функцию клетки и разрабатывать способы её активизации или подавления.

Попробуем расширить концептуализацию, взяв к обсуждению не только признаки клеток одного вида, а множество видов клеток. В этом случае:

Х1 – множество признаков клетки любого вида, которые экспериментально обнаруживаются специальными маркерами;

Х2 – множество видов клеток кожи. Это все те отличные друг от друга клетки, которые участвуют в создании феноменов здоровья кожи.

Родовое отношение имеет следующий вид:

D2 ∈ Х2 × В(Х1). Здесь «×» – знак декартового произведения множеств.

Тип этой структуры: «Множество видов клеток и множество их функций».

Эта структура определяет все ситуации, в которых необходимо различать конкретные видовые клетки со всеми их функциями. Разнообразие таких выделяемых комбинаций – более 100 миллионов (конкретно: F = 100 663 284).

Этот концепт полезен для постановки и решения узких теоретических задач в дерматологии. Так, рассмотрение клеток с их полным набором функций позволяет исследовать особенности действия всех функций каждой видовой клетки и понять, изменит ли влияние на кожу то обстоятельство, что одна и та же функция проявится у разных видовых клеток одновременно. Исходя из того, что количество видовых клеток К = 12, а количество функций каждой видовой клетки равно F = 8 388 607, то разнообразие составов «видовые клетки с их функциями» (S) равно S = K × F = 100 663 284. Разумеется, на эмпирическое изучение свойств всех этих ситуаций понадобятся многие годы. Но простор для теоретических исследований открыт.

Пример.

Предположим, что у нас только три клетки. То есть

Х2 = {1. 2. 3}.

А у каждой клетки (из предыдущего примера) по 7 функций:

Х1 = {{a}, {b}, {c}, {a,b}, {a,c}, {b,c}, {a,b,c}}.

Тогда количество «ситуаций», когда три клетки могут выступать с разными наборами своих функций, определяется прямым произведением:

Х2 × Х1 = 1{a}, 1{b}, 1{c}, 1{a,b}, 1{a,c}, 1{b,c}, 1{a,b,c}, 2{a}, 2{b}, 2{c}, 2{a,b}, 2{a,c}, 2{b,c}, 2{a,b,c}, 3{a}, 3{b}, 3{c}, 3{a,b}, 3{a,c}, 3{b,c}, 3{a,b,c}.

Однако здесь еще не выражены реальные ситуации, при которых в конкретной панч-биопсии кожи обнаруживаются разные по количеству составы видовых клеток. В этом смысле более конструктивным и содержательно богатым следует признать концепт с другой родовой структурой.

Базисные множества этого концепта будут следующими:

Х2 – множество видов клеток кожи;

Х3 – множество функций клеток.

Родовое отношение имеет следующий вид:

D3 ∈ В(Х2 × В(Х3)).

Тип этой структуры: «Множество подмножеств видовых клеток вместе с множеством подмножеств их функций».

Она выражает все ситуации, когда в конкретной пункционной биопсии кожи можно рассматривать отдельно друг от друга такие субпопуляции, в которые собраны клетки всех видов (или лишь нескольких) вместе с их проявившимися функциями. Разнообразие их велико, но измеримо, конкретно это 2^{100 663 284}.

Такие ситуации, возникающие вследствие эволюции состояний клеток кожи, являются «фенотипами субпопуляций». Они являются важным диагностическим признаком, позволяющим судить о течении процессов в коже. Под фенотипом следует понимать совокупность функционально значимых маркеров, характерных для определенных стадий дифференцировки, пролиферации, активации или апоптоза. Относительное и абсолютное количество клеток, имеющих тот или иной фенотип, как раз и является конечным результатом клеточных состояний. Разнообразие их велико:

• Единичные виды клеток и их функции. Это все те фенотипы субпопуляций, которые определяются предыдущим родом структуры;
• Фенотипы субпопуляций, образованные из нескольких видов клеток (не всех) одномоментно вместе с их различными функциями;
• Фенотипы субпопуляций, образованные клетками всех видов, причем каждый вид клетки проявляет одну-две из своих функций;
• Фенотипы субпопуляций, образованные клетками всех видов, причем каждый вид клетки проявляет все свои функции одновременно.

Этот концепт открывает возможность различать фенотипы с полными/неполными наборами видов клеток со всеми разнообразными активностями функций, включая и те, в которых все виды клеток одновременно проявляют все свои функции. На его основе уже можно ставить новые классы задач на исследования ситуаций здоровья/болезни с разными составами функций при полном наборе видовых клеток и других ситуаций. Но в этих концептуальных конструкциях еще не учтены обстоятельства, когда в биоптате кожи оказывается какая-то определенная доля клеток каждого вида с конкретными (разными) функциями. Это будет другой концепт, который выразит полное разнообразие фенотипов субпопуляций клеток. При этом могут быть выражены необычные теоретически возможные ситуации. Например, когда при полном разнообразии клеток всех видов среди клеток одного вида окажутся клетки с разными наборами функций. Это принудит исследователей отвечать на серии вопросов о том, каковы свойства таких фенотипов субпопуляций клеток и как это сопряжено с патологиями, являющимися предметом изучения дерматологии, как науки о коже и ее заболеваниях.

Пример.

Предположим, что у нас только клетки трех видов. То есть

Х2 = {1. 2. 3}.

А у каждой клетки (из предыдущего примера) по 3 функции:

Х3 = {m, n, o}.

Тогда получится увидеть (различить) следующие ситуации:

Ситуация 1: 1m,

Ситуация 2: 1n,

Ситуация 3: 1o,

Ситуация 4: 2m,

Ситуация 5: 2n,

Ситуация 6: 2o,

Ситуация 7: 3m,

Ситуация 8: 3n,

Ситуация 9: 3o,

Ситуация 10: 1n, 1o,

Ситуация 11: 1m, 2m,

Ситуация 12: 1m, 2n, 3o,

Ситуация …: 1m, 2m, 2n, 3n, 3o,

Ситуация …: 1m, 1n, 1o, 2m, 2n, 2o, 3m, 3n, 3o.

Результаты проведенной концептуализации указывают на то, что «единицей» исследования состояний кожи становится не картина ее патологических симптомов, а особенности субпопуляции клеток ее конкретного участка. Каждая субпопуляция, состоящая из клеток одновременно всех видов, отражает специфическую функционально-клеточную структуру элементарного фрагмента кожи и представляет собой ее специфический фенотип.

Строгость концептуальных различий позволяет выйти на широкий класс исследовательских задач в дерматологии, опирающейся на различия фенотипов субпопуляций клеток кожи, а переход от симптоматического подхода в лечении заболеваний кожи к фенотипическому является переходом к дерматологии нового типа – фенотипической дерматологии. В ее основание должны быть положены сведения о свойствах всех возможных фенотипов субпопуляций клеток кожи. Основанную на способе получения цитоиммунограмм и выраженную в схемах концептуального подхода, фенотипическую дерматологию интересуют объективные факты, возможные для контроля и встречной проверки.

Практические наблюдения

С помощью инструмента для биопсии у 80 пациентов, разделённых на пять групп по 16 человек в каждой из которых 8 женщин и 8 мужчин, был осуществлен забор биоптатов кожи патентованным способом [7]. Из общей гетерогенной популяции клеток кожи были получены субпопуляции клеток, определен их фенотип в нативном и криоконсервированном образце (табл. 1), с распределением полученных данных по полу и возрасту (табл. 2).

Таблица 1. Сравнительная оценка фенотипов клеток в нативном и криоконсервированном биоптате кожи, n=80

Таблица 2. Половозрастная характеристика фенотипов клеток кожи условно здоровых людей

Результаты демонстрируют жизнеспособность клеток кожи нативных образцов до 99,8 % и до 87,0 % после криоконсервации. Кроме того, при сравнении процентного соотношения клеток кожи различных субпопуляций достоверных расхождений в показателях не было обнаружено.

Представленные наблюдения демонстрируют новые диагностические возможности. В частности, показано статистически значимое снижение функциональной активности клеток в крайних возрастных группах обследуемых обоих полов. Некоторые значения демонстрируют достоверное различие и в более близких по возрасту группах. При этом, жизнеспособность клеток остаётся идентичной во всех группах сравнения даже при исследовании ранее криоконсервированных образцов.

Заключение

Оценка субпопуляционного состава клеток кожи уже сегодня позволяет перейти к исследованию заболеваний кожи, сопровождающихся значительными изменениями количества клеток и появлением уникальных мембранных событий на их поверхности, в своей совокупности характеризующих определенные клинические состояния.

Проделанная работа позволяет сделать следующие выводы.

1. Синтез методов экспериментальной дерматологии, технологически поднявшейся на уровень изучения фенотипа клеток кожи, совместно с методами концептуального анализа результатов исследований, показал свою практичность.
2. Концептуализация цитоиммунограмм кожи показывает колоссальное разнообразие ситуаций для изучения, что позволяет вывести дерматологию на уровень прогнозов развития патологий, существенно опережающих фронт естественного усложнения патогенеза заболеваний кожи.
3. Предложена диагностическая панель маркеров дифференцирования клеток, учитывающая функциональную активность различных субпопуляций клеток кожи и характеризующая динамику их состояний.
4. Обосновано применение проточной цитометрии и как ее результат получение цитоиммунограмм в качестве метода, значительно расширяющего возможности диагностических и научных исследований кожи.
5. Углубление концептуальных различений клеточных феноменов позволяет сформировать новые научно-исследовательские направления в дерматологии. Особенно перспективной в этом плане представляется концептуальная экспликация феноменологии состояний кожи, обусловленная динамикой состояний клеток.
6. Впервые показано, что в качестве концептуальной «единицы», объясняющей разнообразие состояний кожи, необходимо взять фенотип субпопуляций. Фенотип субпопуляции представляет собой особенную, отличную от других субпопуляцию, состоящую из клеток кожи одного вида и имеющую специфическую функционально-клеточную структуру элементарного фрагмента кожи.

Важнейший результат проделанной работы в том, что впервые дерматология приблизилась к разрешению противоречия между наблюдаемыми проявлениями заболевания кожи и скрытым множеством феноменов на уровне клеток кожи. Количественные изменения на поверхности клеток, выражаемые маркерами функциональной активности, отражают истинность мембранных событий, которые приводят к качественным изменениям кожи в виде появления разнообразия элементов сыпи. Понимание этой связи позволит поднять дерматологию на качественно новые уровни познания.

Список литературы

1. Козлова Н.Н., Прокопенко В.Д. Кожа как иммунный орган. Иммунопатология, аллергология, инфектология. 2006;4:34–40 [Kozlova NN, Prokopenko VD. The skin as an organ of immunity. Immunopatologiya, allergologiya, infektologiya. 2006;4:34-40 (In Russ.)]
2. Боровик Т.Э., Макарова С.Г., Дарчия С.Н., Гамалеева А.В., Грибакин С.Г. Кожа как орган иммунной системы. Педиатрия. 2010;89(2):132-136 [Borovik TE, Makarova SG, Darchiya SN, Gamaleeva AV, Gribakin SG. Skin as an organ of the immune system. Pediatriya. 2010;89(2):132–136. (In Russ.)]
3. Антонова О.В., Трофимов П.Н., Хайрутдинов В.Р., и др. Современные представления о дендритных клетках кожи. Вестник дерматологии и венерологии. 2016;92(1):17–20 [Antonova OV, Trofimov PN, Khairutdinov VR, et al. Modern concepts of skin dendritic cells. Vestnik dermatologii i venerologii. 2016;92(1):17–20. (In Russ.)] doi: 10.25208/0042-4609-2016-92-1-17-20
4. Хайдуков С.В. Подходы к стандартизации метода проточной цитометрии для иммунофенотипирования. Настройка цитометров и подготовка протоколов для анализа. Медицинская иммунология. 2007;9(6):569–574 [Khaidukov SV. Approaches to standardization of the flow cytometry method for cells immunophenotyping. Cytomers adjustment and preparation of protocols for analysis. Medical Immunology. 2007;9(6):569-574. (In Russ.)] doi: 10.15789/1563-0625-2007-6-569-574
5. Гольцов С.В., Суховей Ю.Г. Способ получения жизнеспособной гетерогенной популяции клеток кожи. Патент RU 2502999 [Goltsov SV, Sukhovei UG. Method for producing viable heterogenous skin cell population. Patent RU 2502999]
6. Clark RA, Chong B, Mirchandani N, Brinster NK, Yamanaka K. The vast majority of CLA+ T cells are resident in normal skin. J Immunol. 2006; 176(7):4431–4439. doi: 10.4049/jimmunol.176.7.4431
7. Гольцов С.В., Костоломова Е.Г., Суховей Ю.Г., Паульс В.Ю. Способ определения субпопуляционного состава клеток кожи и получения цитоиммунограммы кожи. Патент RU 2630607 [Goltsov SV, Kostolomova EG, Sukhovei UG, Pauls VU. Method for determining subpopulation composition of skin cells and obtaining skin cytoimmunogram. Patent RU 2630607 C1]
8. Никаноров С.П. Концептуальные методы. Проблемы и решения. Концепт. 2001;12:118–127 [Nikanorov SP. Conceptual methods. Problems and solutions. Concept. 2001;12:118–127 (In Russ.)]
9. Теслинов А.Г. Концептуальное мышление в разрешении сложных и запутанных проблем. СПб.: Питер; 2009. с. 288 [Teslinov AG. Conceptual thinking in solving complex and intricate problems. St. Petersburg: Peter; 2009. P. 288 (In Russ.)]
10. Бурбаки Н. Теория множеств. М.: Мир; 1965. с. 456 [Bourbaki N. Theory of sets. Moscow: Mir; 1965. P. 456 (In Russ.)]
11. Никаноров С.П. Введение в аппарат ступеней множеств. М.: Московская городская организация Союза писателей России; 2013. c. 349 [Nikanorov SP. Introduction to the apparatus of steps of sets. Moscow.: Moscow city organization of the Writers Union of Russia; 2013. P. 349 (In Russ.)]
12. Никаноров С.П. Концептуализация предметных областей. Методология и технология. М.: Концепт; 2009. c. 268 [Nikanorov SP. Conceptualization of subject areas. Methodology and technology. Moscow: Concept; 2009. P. 268 (In Russ.)]