Известно, что фибробласты и кератиноциты сохраняют способность синтезировать компоненты внеклеточного матрикса – коллаген, тропоэластин и фибронектин, а также способность удерживать гиалуроновую кислоту за счет высокого уровня экспрессии рецептора CD44+ на поверхности. Выделение их в жизнеспособном состоянии, как объекта последующей активации, позволило не только количественно и функционально описать каждую клеточную субпопуляцию отдельно от всех других, но и в дальнейшем воздействовать на выделенные субпопуляции различными веществами, в том числе активатором ксеногенного происхождения а также после криоконсервации биоптатов (табл.4.12 и 4.13).
Таблица 4.12. Результаты активации клеток кожи человека цитокинами и активатором ксеногенного происхождения
| Субпопуляции клеток кожи | Фенотип | Активация ксеногенным активатором |
Активация цитокинами |
||
| 75 мкг/мл активатора |
150 мкг/мл активатора |
ИЛ-1 2мкг/мл |
ИЛ-6 2мкг/мл |
||
| Кератиноциты, из них активированные |
CD49f+ CD49f+ HLA-DR+ |
55,0 9,6 |
79,2 40,5 |
80,9 15,6 |
54,0 13,5 |
| Фибробласты, из них активированные |
CD45– CD14– CD44+ CD45– CD14– CD44+ CD80+ |
81,3 10,5 |
74,3 25,1 |
92,6 7,0 |
93,1 6,9 |
| Клетки Лангерганса, из них активированные |
CD207+ CD207+ CD80– HLA-DR+ CD207+ CD80+ HLA-DR– CD207+ CD80+ HLA-DR+ |
63,1 0,9 1,2 19,6 |
49,2 0,2 6,4 14,2 |
60,9 1,0 10,0 0,6 |
45,3 0 6,4 0 |
| Эндотелиальные клетки, из них активированные |
CD146+ CD146+ CD54– HLA-DR+ CD146+ CD54+ HLA-DR– CD146+ CD54+ HLA-DR+ CD146+ CD34+ |
2,7 0 20,9 35,1 70,2 |
2,6 1,0 43,1 25,8 69,0 |
0,7 0,2 70,2 7,0 60,2 |
0,8 0 70,6 5,1 59,2 |
| Тучные клетки, из них активированные |
CD249+ CD249+ CD63+ |
3,2 0,9 |
19,5 18,6 |
10,3 15,6 |
7,1 1,0 |
| Моноциты, из них активированные |
CD45+ CD14+ CD45+ CD14+ HLA-DR+ |
9,5 3,2 |
20,3 10,6 |
5,8 1,0 |
7,0 2,9 |
| Эпидермальные лимфоциты Т-общие Т-хелперы Т-цитотоксические В-лимфоциты NK-клетки |
CD45+ CD3+ CD45+ CD3+ CD4+ CD8– CD45+ CD3+ CD4– CD8+ CD45+ CD3+ CD19+ CD45+ CD3– CD16+ CD56+ |
12,0 9,0 3,0 15,2 10,6 |
14,1 11,3 1,9 14,7 14,0 |
13,2 10,0 3,0 6,9 10,2 |
12,9 10,3 2,4 15,9 11,1 |
Таблица 4.13. Результаты активации клеток кожи человека ФНОα и ИНФγ в нативных и криоконсервированных образцах
| Субпопуляции клеток кожи | Фенотип | Образец ex tempore | Образец после криоконсервации |
||||
| % | ФНОα 2мкг/ мл |
ИНФγ 2мкг/мл |
% | ФНОα 2мкг/мл | ИНФγ 2мкг/мл |
||
| Кератиноциты, из них активированные |
CD49f+ CD49f+ HLA-DR+ |
54,0 6,9 |
58,2 9,3 |
76,6 8,9 |
54,6 1,3 |
56,0 8,3 |
69,4 8,0 |
| Фибробласты, из них активированные |
CD45– CD14– CD44+ CD45– CD14– CD44+ CD80+ |
86 6,2 |
82,1 8,9 |
92,6 8,4 |
66,8 3,5 |
79,4 6,2 |
85,1 7,9 |
| Клетки Лангерганса, из них активированные |
CD207+ CD207+ CD80– HLA-DR+ CD207+ CD80+ HLA-DR– CD207+ CD80+ HLA-DR+ |
46,1 0 4,9 0,3 |
30,2 0 5,0 0,3 |
64,9 11,6 4,5 1,9 |
46,4 0 1,3 3,5 |
28,3 0 1,9 3,1 |
62,3 5,0 3,9 1,0 |
| Эндотелиальные клетки, из них активированные |
CD146+ CD146+ CD54– HLA-DR+ CD146+ CD54+ HLA-DR– CD146+ CD54+ HLA-DR+ CD146+ CD34+ |
0,6 0 60,3 5,4 59,0 |
0,9 0,1 15,9 1,2 35,2 |
1,9 1,5 20,0 2,3 62,0 |
0,6 0 50,0 0 36,0 |
0,8 0 16,1 0,9 29,1 |
1,6 0,5 22,3 1,9 44,0 |
| Тучные клетки, из них активированные |
CD249+ CD249+ CD63+ |
6,8 1,1 |
6,5 1,3 |
10,7 9,8 |
2,5 1,6 |
4,7 1,9 |
9,2 7,1 |
| Моноциты, из них активированные |
CD45+ CD14+ CD45+ CD14+ HLA-DR+ |
7,0 2,6 |
22,0 6,8 |
24,5 3,8 |
5,6 0 |
16,2 2,6 |
19,3 3,0 |
| Эпидермальные лимфоциты Т-общие Т-хелперы Т-цитотоксические В-лимфоциты NK-клетки |
CD45+ CD3+ CD45+ CD3+ CD4+ CD8– CD45+ CD3+ CD4– CD8+ CD45+ CD3+ CD19+ CD45+ CD3– CD16+ CD56+ |
13,0 11,9 1,2 8,1 12,5 |
16,2 14,0 2,2 15,3 23,6 |
25,0 15,0 5,0 9,2 18,2 |
11,2 9,9 1,3 7,0 9,5 |
12,9 10,0 2,9 13,2 20,6 |
19,3 13,5 5,8 8,6 16,2 |
Полученные результаты активации позволили спланировать оценку эффективности разработанной полезной модели у больных с повреждениями кожи.
