мои проекты
Фото Видео Блог Книги
Сергей Гольцов
служу искусству врачебного сомнения
РУС | ENG

РОЛЬ ФЕНОТИПИЧЕСКОГО РАЗНООБРАЗИЯ КЛЕТОК КОЖИ В ПРАКТИКЕ ДЕРМАТОЛОГА

РОЛЬ ФЕНОТИПИЧЕСКОГО РАЗНООБРАЗИЯ КЛЕТОК КОЖИ  В ПРАКТИКЕ ДЕРМАТОЛОГА
ВВЕДЕНИЕ

Состоявшийся в 2017 году Совет при Президенте РФ по стратегическому развитию и приоритетным проектам обозначил главные критерии результативности сферы здравоохранения – точная и быстрая диагностика, действенное лечение...

Глава 1. АКТУАЛЬНОСТЬ РАЗВИТИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ И ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИХ ПОДХОДОВ В ДЕРМАТОЛОГИИ

Тенденции развития науки наглядно демонстрируют, что ее достижения связаны с новыми технологиями исследовательской деятельности и с прогрессивными типами мышления исследователей. Последнее продиктовано высоким спросом на ускоренное появление как отдельных научных открытий и их скорейшее внедрение в практику, так и на порождение классов открытий, формирующих фронт решений актуальных проблем медицины.

1.1. Кожа человека как познавательная сложность

Дерматология всегда рассматривалась как эмпирическая наука, основанная на систематизации наблюдаемых доктором внешних проявлений заболеваний кожи. Традиция наблюдений, базирующаяся на практическом опыте, формировала этот опыт последовательностью субъективных заблуждений и опровержений. Каждому следующему поколению докторов предоставлялся (и предоставляется по сей день) шанс прочувствовать все диагностические затруднения. Дерматолог, ориентируясь на ранее полученный кем-то опыт и соотнеся его с собственным опытом предыдущих наблюдений, вносит свой «вклад» в укрепление парадигмы диагностического поведения, что в совокупности не создает дерматологии предпосылок дальнейшего развития.

1.2. Актуальность метода проточной цитометрии для выявления фенотипического разнообразия клеток кожи

Длительное время единственным способом получения объективной информации о морфофункциональном состоянии клеток кожи оставалась инцизионная биопсия, инвазивность которой ограничивала ее применение и практически исключала динамические наблюдения...

1.3. Современные данные о заболеваемости некоторых распространенных заболеваний кожи в контексте проблем их диагностики

Совершенствование системы раннего выявления заболеваний кожи имеет высокую социальную значимость и является одной из приоритетных целей государственной политики в области охраны здоровья граждан Российской Федерации, что отражено...

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Всего в исследовании было задействовано 100 добровольцев, из них 80 условно здоровых лиц для оценки применения проточной цитометрии, 6 пациентов с социально-значимыми хроническими заболеваниями кожи в основе которых лежат иммунные механизмы для демонстрации новых диагностических возможностей цитоиммунограмм кожи и 4 пациента для демонстрации применения разработанной полезной модели – амплификатора репаративных потенций...

Глава 3. МЕТОД ПРОТОЧНОЙ ЦИТОМЕТРИИ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ФЕНОТИПИЧЕСКОГО РАЗНООБРАЗИЯ КЛЕТОК КОЖИ

Технические возможности проточной цитометрии, позволяющие анализировать субпопуляции клеток и идентифицировать любое их количество, а также измерять их поверхностные и внутриклеточные маркеры, оценивая их функциональное состояние, вместе с запросом врачей-дерматологов к более строгому пониманию патологических процессов на клеточном уровне обязывают к методологической стандартизации диагностических возможностей и подходов к измерению открывшегося разнообразия функциональных состояний клеточных фенотипов кожи для диагностической и лечебной практики...

3.1. Концептуальное обоснование проблемы исследования фенотипов клеток кожи

Обозначенные вопросы обнажают проблему, которая формулируется следующим образом: как возможно увидеть и понять картину состояний кожи, открывающуюся на уровне исследования ее клеточных фенотипов, с практическим...

3.2. Возможности практического применения способа получения цитоиммунограмм кожи

Методом проточной цитометрии проводилось фенотипирование клеточной суспензии с использованием специфических маркеров CD3, CD4, CD8, CD14, CD16, CD19, CD34, CD44, CD45, CD49, CD54, CD63, CD80, CD146, CD203c, CD207, CD249, с помощью которых идентифицировались субпопуляции клеток...

Глава 4. РЕАЛИЗАЦИЯ РАЗВИТИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКОЙ И ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКОЙ ПРАКТИКИ В ДЕРМАТОЛОГИИ

Критическое сравнение критериев диагностики при визуальном осмотра сыпи, рекомендуемых Федеральными клиническими рекомендациями (2016) с фактическими результатами цитоиммунограмм кожи из воспалительных инфильтратов сыпи больных социально-значимых заболеваний кожи (красный плоский лишай, псориаз, атопический дерматит, парапсориаз, экзема, лимфома кожи) обосновывает необходимость количественной и функциональной оценки состояния клеток основных субпопуляций кожи у каждого отдельно взятого пациента, с его уникальным анамнезом жизни, возрастными...

4.2. Практическая реализация концептуализации на примере изобретения амплификатора репаративных потенций клеток кожи

Классические дерматологические подходы к ранозаживлению основываются на различных видах наружной терапии, направленной на скорейшее закрытие тканевого дефекта «любой ценой», в том числе и с формированием рубца. И поскольку основные звенья эволюции раны трактуются с позиций скрытой хронической аутоиммунной патологии, терапевтические мероприятия часто сводятся к антибактериальным и иммуносупрессивным воздействиям...

4.3. Зависимость жизнеспособности и апоптоза клеток от концентрации активатора

Ряд ученых показали, что апоптоз играет важную роль в процессах регенерации ткани при заживлении раны. Если апоптоза не возникает, то воспалительные процессы продолжаются, поскольку из некротизированных клеток продолжают поступать провоспалительные факторы, такие как, например, лизосомальные протеолитические ферменты и метаболиты арахидоновой кислоты. Замедление же процессов апоптоза приводит к замене грануляционной ткани окончательной рубцовой тканью...

4.4. Ранозаживление с участием лабораторных животных в условиях эксперимента

Формирование инфицированных ран у лабораторных животных проводили в стандартных условиях...

4.5. Примеры активации репаративных процессов на уровне клеток кожи человека

Известно, что фибробласты и кератиноциты сохраняют способность синтезировать компоненты внеклеточного матрикса – коллаген, тропоэластин и фибронектин, а также способность удерживать гиалуроновую кислоту за счет высокого уровня экспрессии рецептора CD44+ на поверхности. Выделение их в жизнеспособном состоянии, как объекта последующей активации, позволило не только количественно и функционально описать каждую клеточную субпопуляцию отдельно от всех других, но и в дальнейшем воздействовать на выделенные субпопуляции различными веществами, в том числе активатором ксеногенного происхождения...

4.6. Клиническая демонстрация применения амплификатора репаративных процессов для восстановления кожи при повреждении

Демонстрируется пациент А., 35 лет с диагнозом: Термический ожог лица пламенем IIIА степени, S = 5%. Ожидаемые результаты от традиционного лечения: средний срок формирования грануляций при ожоговых ранах IIIА степени составляет 21 день и средний срок пребывания в стационаре пациентов с глубокими ожогами – 30-35 дней.

4.7. Клиническая эффективность реализации способа активации клеток определенного фенотипа для лечения ран различной этиологии на примере изобретения ранозаживляющего средства Cellgel

В отечественной и зарубежной медицине длительное время остается насущным спрос на научные разработки, ускоряющие ранозаживление кожи . Исходя из представления о ранах, главной задачей ранозаживления всегда считалось восстановление функциональности кожи без рубцовых осложнений .

Механизмы репарации неразрывно связаны с воспалением и формируют с ним единую реакцию на повреждение...

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Оценка субпопуляционного состава клеток уже сегодня позволяет перейти к исследованию заболеваний кожи, сопровождающихся значительными изменениями количества клеток и появлением уникальных мембранных событий на их поверхности, в своей совокупности характеризующих определенные клинические состояния. Возможность исследовать криоконсервированные образцы позволяет сделать повторные исследования спустя некоторое время для тех, кто мог бы усомниться в полученных результатах...

ВЫВОДЫ

Синтез методов экспериментальной дерматологии, технологически поднявшейся на уровень изучения и оперирования комплексами клеток кожи, с методами концептуального анализа результатов экспериментов показал свою продуктивность в порождении большого количества классов новых понятий в отрасли медицины, явно исчерпавшей потенциал сложившейся в ней научной парадигмы..

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Разработанный подход к применению проточной цитометрии для исследования и оценки отдельных субпопуляций клеток кожи, позволяет применять полученные данные в повседневной исследовательской и диагностической практике дерматолога.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

CD49f+ кератиноциты

CD49f + HLA-DR+ активированные кератиноциты

CD45-CD14-CD44+ фибробласты (фиброциты)

CD45-CD14-CD44+CD80+ активированные фибробласты (фиброциты)

CD249+ тучные клетки

CD249+CD63+ активированные тучные клетки

CD45+CD14+ моноциты (макрофаги)

CD45+CD14+HLA-DR+ активированные моноциты (макрофаги)

CD207+ внутриэпидермальные макрофаги

CD207+CD80+ активированные внутриэпидермальные макрофаги

CD207+HLA-DR+ активированные внутриэпидермальные макрофаги

CD207+CD80+HLA-DR+ активированные внутриэпидермальные макрофаги

CD146+ эндотелиальные клетки

CD146+CD34+ активированные эндотелиальные клетки

CD146+HLA-DR+ активированные эндотелиальные клетки

CD146+CD54+ активированные эндотелиальные клетки

CD146+CD54+HLA-DR+ активированные эндотелиальные клетки

CD45+CD3+ Т-лимфоциты

CD45+CD3+CD4+CD8– Т-хелперы

CD45+CD3+CD4-CD8+ Т-супрессоры

CD45+CD3-CD19+ В-лимфоциты

CD45+CD3-CD16+CD56+ NK-лимфоциты

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ
1.1