мои проекты
Фото Видео Блог Книги
Сергей Гольцов
служу искусству врачебного сомнения
РУС | ENG

Регенераторно-репаративные и антибактериальные свойства препарата «CELLGEL» в эксперименте

Ключевые слова: лечение инфицированной раны, репарация, антибактериальный эффект, ранозаживляющее средство Cellgel

Необходимость в создании препаратов, обладающих одновременно антибактериальным и репаративным эффектом, остается актуальной и сегодня. Заживление раны - это сложный биологический процесс, включающий фазы воспаления, реэпителизации, образования грануляционной ткани и реорганизации внеклеточного матрикса [4]. Одним из важнейших условий этого процесса является  нейтрализация и элиминация  патогенов, всегда проникающих в рану.

Cellgel – ранозаживляющее средство,  являющееся результатом сорбции на биополимере (гидроксиэтилцеллюлоза) коктейля биологически активных молекул, продуцируемых клетками куринного эмбриона. Экспериментальные работы с различными вариантами данного препарата, показали, что он обладает антибактериальной и репаративной активностью. Запатентованный препарат Cellgel (Патент № 2011141622 от 13.10.2011)  был исследован в условиях эксперимента.

Цель исследования – изучить антибактериальные свойства ранозаживляющего средства Cellgel и его влияние на динамику заживления гнойной инфицированной раны. 

Материалы и методы

Эксперимент выполнен на 80 половозрелых кроликах – самцах. Содержание и экспериментальные процедуры проводились в соответствии с правилами Совета Европейского сообщества (Директива 86/309/ЕЕС от 24.11.1986). Использовалась модель инфицированной раны мягких тканей. (Патент № 2006122640 от  23.06.2006). Через 3 суток некротический струп удаляли механическим путем и в рану вносили 500 тыс КОЕ St. Aureus. Лечение животных начинали через 5 суток после формирования инфицированной раны мягких тканей. 

Животные были разделены на 4 группы: экспериментальная группа и три группы контроля (по 20 кролов в каждой). В каждой группе 1 раз в сутки выполняли перевязку с определенным для каждой группы лекарственным веществом.

  1. «Экспериментальная группа» на рану наносили Cellgel. 
  2. Группа «Контроль основы» на рану наносили только основу геля. 
  3. Группа контроля «Традиционное лечение»  лечение проводили  в зависимости от фазы течения раневого процесса: в фазу воспаления применяли повязки с мазями на водной основе, в фазу регенерации и эпителизации – с мазями на жировой основе.
  4. Группа контроля «Без лечения». 

На 1, 3, 5, 7, 10, 15 сутки оценивали размеры раневого дефекта, наличие отека, гиперемии, отделяемого из раны и его характер. В эти же сроки под местной анестезией выполняли биопсию раны через все слои на глубину до 1.8 – 2.2 см. Материал фиксировали в 96% этиловом спирте, заливали в парафин и готовили гистологические срезы, которые окрашивали гематоксилином Майера и эозином с последующим анализом морфологической картины [1,2].

Антибактериальная активность оценивалась по общепринятой методике «Определение чувствительности микробов к антибиотикам методом диффузии в агар с применением бумажных дисков» [3].

Результаты исследования

Диаметры зон подавления роста St. aureus 155 препаратом Cellgel, (32,7 ± 2,1 мм) достоверно больше «Гентамицина сульфата» (23,1 ± 1,8мм. соответственно). Гель также обладает высокой  активностью в отношении E. Coli 2290 и B. cereus Jp 5832. 

У всех животных были сформированы раны неправильно округлой формы 3.9-4.1 см в диаметре. Глубина раневого дефекта достигает 2 см.  Вокруг раны очаг инфильтрации до 3.5 см в диаметре. Стенки раны гиперемированы, плотные, спаяны с окружающими тканями, дно покрыто плотным налетом фибрина, выделяется до 2-3 мл гнойного отделяемого белесоватого цвета тестоватой консистенции.

При гистологическом исследовании определяются очаги некроза в соединительной и мышечной ткани, расширение кровеносных сосудов со стазом крови, экссудация лейкоцитов. Сосочковый слой дермы имеет четкое разграничение на слои: с выраженной клеточной инфильтрацией, представленной моноцитами, единичными макрофагами и рыхлой соединительной тканью с большим количеством фиброцитов, единичными фибробластами, единичными моноцитами, плазмоцитами.

На 1 сутки в экспериментальной группе раневой дефект сохраняет свои размеры (4 ± 0.5 см в диаметре). Вокруг раны сохраняется умеренная гиперемия кожи, стенки раны мягкие при пальпации, дно раны покрыто налетом фибрина, гноя нет. На 3 сутки наблюдается уменьшение размеров дефекта ткани до 0.2 – 0.3 мм в диаметре, рана покрыта струпом бледно – серого цвета, вокруг располагается очаг эпителизации до 2.5 – 3.0 мм в диаметре. Гиперемия и инфильтрация вокруг раны не определяется. При гистологическом исследовании в ране определяется рыхлая соединительная ткань с небольшой лейкоцитарной инфильтрацией, единичными укрупненными фибробластами, лимфоцитами, плазмоцитами, эозинофилами и моноцитами. Очаги пролиферации эндотелия сосудов без просвета, с многорядностью расположения ядер. На 5 сутки дефект кожи отсутствует, определяется очаг эпителизации до 2 см в диаметре. Микроскопически поверхность покрыта многослойным плоским эпителием, подэпителиально определяется лимфоплазмоцитарная инфильтрация. 

На 10 – 15 сутки эксперимента констатирована полная эпителизация раневого дефекта с его оволосением. Гистологически отмечается пролиферативная активность клеток фибробластического ряда, трубчатая пролиферация фибробластов и эндотелия сосудов. В подкожной клетчатке определяются неповрежденные нервные стволики, что соответствует гистологической картине эпителизации раны с сохранением всех функционирующих структур. 

Во всех группах контроля  на 1 сутки раны сохраняют свои размеры. При этом стенки ран сохраняют свою плотность, спаяны с окружающими тканями, вокруг раны сохраняется плотный инфильтрат, при механическом воздействии из раны выделяется гной, дно раны покрыто гнойной пленкой. 

У животных 2 группы раны сохраняют свои размеры до 10 суток эксперимента, рана покрыта налетом фибрина, края и стенки раны плотные. При гистологическом исследовании определяется отек, лимфогистиоцитарная инфильтрация и дистрофически- дегенеративные изменения подкожной клетчатки, мышечного слоя. Закрытие раневого дефекта 22- 25 суткам эксперимента не происходит. 

В группе 3 в течение раневого процесса прослеживаются все фазы: экссудации, пролиферации и регенерации. Закрытие раневого дефекта происходит к 20 - 25 суткам с формированием грубого соединительно – тканного рубца, гистологически в эти сроки сохраняются дистрофически- дегенеративные изменения подкожной клетчатки и мышц, дегенеративные изменения нервных стволиков. 

В группе  4 у 5 животных на 5 – 10 сутки развилась флегмона подкожной клетчатки, что привело к гибели животных. У оставшихся мы не смогли добиться закрытия раневого дефекта к 25 – 30 суткам эксперимента и животные были выведены из эксперимента.

На наш взгляд, значительное (в 5 раз) ускорение очищения раны в первую фазу раневого процесса в экспериментальной группе по сравнению с группами контроля, а так же эпителизация раны без образования соединительнотканного рубца с восстановлением функции поврежденного участка (рост волосяного покрова) характеризуют потенцирование ранозаживляющим средством Cellgel механизмов физиологической репаративной регенерации.

Эффект применения препарата Cellgel позволяет сделать вывод о его потенциирующем влиянии на течение процессов репаративной регенерации.

Литература

  1. Гистологическая техника:Учебное пособие / Под редакцией В.В.Семченко, С.А.Барашкова, В.Н. Ноздрина, В.Н.Артемьева. – Омск-Орёл: Омская областная типография, 2006.
  2. Принципы иметоды гистоцитохимического анализа в патологии, под ред. А.П. Авцына и др., Л., 1971, библиогр.
  3. Bauer A.W., Kirby W.M.M., Sherris J.C., Turck M // Am. J. Clin. Path. - 1966. - Vol. 45. - P. 493-496.
  4. Singer A.J., Clark R.A.F. Cutaneous wound healing  // New Engl.  J. Med. — 1999. — Vol. 341. — P. 738–746.

Ещё в блоге:

Некоторые иммунофизиологические механизмы регенерации ран в условиях применения ранозаживляющего средства «Cellgel»
Некоторые иммунофизиологические механизмы регенерации ран в условиях применения ранозаживляющего средства «Cellgel»

Проведен эксперимент на 40 половозрелых кроликах с целью сравнения пролиферативной и апоптотической активности клеток эпидермиса и дермы при формировании грубого соединительнотканного рубца и эпителизации раны без образования рубца с восстановлением функции поврежденного участка... читать о результатах эксперимента

В поисках затерянного во времени племени
В поисках затерянного во времени племени

Это потом спросим мы себя, куда и зачем мы пошли? Подумалось так еще под вывеской ПОЛИЦИЯ ПО КАННИБАЛИЗМУ... Но, было уже поздно, теперь только вперёд, утешая себя тем, что мы одни из немногих на этой планете, кто был дальше этой вывески. Далее...

 

А как часто вы посещаете маммолога?

Каждый год в России выявляется более чем 60 000 случаев злокачественных новообразований молочных желез у женщин. Далее...

Соль величия
Соль величия

Не знаю, чему больше удивляться – тому, что увидел или тому, что узнал? Нет ответа у меня на этот вопрос, но, как человека от примата отличает способность делиться, так и меня тянет разделить увиденное с вами, дорогие друзья и подписчики.

Читать далее...